Задача

Задание 9. А) При изучении различных свойств выявляемых вирусов, разработке методов лекарственной терапии, получении вакцинных штаммов и для множества иных целей бывает необходимо пассировать эти вирусы в лаборатории. При этом необходимо проводить количественную оценку получаемых вирусных препаратов с точки зрения их концентрации - титр вируса. Пассажи вирусов гриппа часто проводят на куриных эмбрионах, при этом титр можно определять в простейшей реакции гемагглютинации (РГА). Для ее постановки предварительно во все лунки специального серологического планшета с круглодонными лунками (рис B) вносится по 1 объему буферного раствора (0,15 М NaCl, 0,01 М Tris-HCl, pH 7,2), затем, туда же, вносят анализируемый вирусный препарат последовательными двукратными разведениями. Для этого в первую лунку по горизонтали вносится 1 объем взвеси вируса, перемешивается, и объем, равный внесенному, переносится в следующую лунку. Таким образом делаются последовательные разведения во всей линии лунок, из последней лунки в линии после перемешивания удаляется объем равный вносимому. К разведениям вирусного препарата в лунках планшета добавляют равный объем взвеси куриных эритроцитов (1%) и проводят инкубацию (30 мин). Гемагглютинин вируса гриппа позволяет ему связываться с поверхностью клетки, в том числе эритроцита. Из-за этого происходит связывание вирусами эритроцитов в агрегаты. Там, где РГА не прошла, эритроциты в круглодонных лунках скапливаются на дне в виде яркого локального кружка (рис C), там, где РГА прошла, обнаруживаются специфические "зонтики" агрегатов эритроцитов (рис D). В качестве титра вируса берут величину обратную последнему разведению вируса, которое еще дает гемагглютинацию. Титр, соответственно, выражают в гемагглютинирующих единицах (ГАЕ). Посмотрите на рис. E и скажите, какие титры показывает РГА. Для простоты - частичную гемагглютинацию считаем полной.

Б) Попробуем оценить количество вирионов в препаратах. Известно, что одна гемагглютинирующая единица составляет порядка (10⁴ – 10⁶ ) вирионов. Оцените количество вирионов в препаратах, титровавшихся на рис E (от минимального значения - до максимального значения) в тех объёмах, которые были внесены в первые лунки (0.5 мл)